日本TSK凝胶色谱柱是在一根不锈钢空心细管中加入孔径不同的微粒作为填料。每根色谱柱都有一定的相对分子质量分离范围和渗透极限,日本TSK凝胶色谱柱有使用的上限和下限。
日本TSK凝胶色谱柱的使用上限是当聚合物zui小的分子的尺寸比色谱柱中zui大的凝胶的尺寸还大,这时高聚物进入不了凝胶颗粒孔径,全部从凝胶颗粒外部流过,这就没有达到分离不同相对分子质量的高聚物的目的。而且还有堵塞凝胶孔的可能,影响色谱柱的分离效果,降低其使用寿命。
日本TSK凝胶色谱柱的使用下限就是当聚合物中zui大尺寸的分子链比凝胶孔的zui小孔径还要小,这时也没有达到分离不同相对分子质量的目的。
日本TSK凝胶色谱柱分离原理
让被测量的高聚物溶液通过一根内装不同孔径的日本TSK凝胶色谱柱,柱中可供分子通行的路径有粒子间的间隙和粒子内的通孔(较小)。当聚合物溶液流经色谱柱时,较大的分子被排除在粒子的小孔之外,只能从粒子间的间隙通过,速率较快;而较小的分子可以进入粒子中的小孔,通过的速率要慢得多。经过一定长度的色谱柱,分子根据相对分子质量被分开,相对分子质量大的在前面(即淋洗时间短),相对分子质量小的在后面(即淋洗时间长)。自试样进柱到被淋洗出来,所接受到的淋出液总体积称为该试样的淋出体积。
当仪器和实验条件确定后,溶质的淋出体积与其分子量有关,分子量愈大,其淋出体积愈小。